Unterschied zwischen RT-PCR und QPCR

Reverse Transkriptionspolymerase-Kettenreaktion (RT-PCR)

RT-PCR vs. QPCR

Fortschritte in der Biotechnologie haben zur Entdeckung verschiedener Wege geführt, um den Anforderungen an Organtransplantationen im Laufe der Jahre gerecht zu werden. Früher konnte eine Person, die freiwillig unmittelbar nach dem Tod ein Organ an einen bedürftigen Patienten spendete, die Operation für Transplantationen nur beginnen. Die kontinuierlichen Studien und Forschungen der Biologen führten zur Entdeckung von Stammzellen.

Stammzellen beziehen sich auf solche, die der DNA eines Embryos entnommen werden, die als Quelle für die Regeneration von Zellen dienen wird, die im Wesentlichen ein Klon des Organs sind, in dem die DNA gewonnen wurde. Während sich Menschenrechtsaktivisten für die Einstellung solcher Verfahren einsetzen, haben erfolgreiche Operationen tatsächlich die Wirksamkeit der Stammzellentwicklung bei Organtransplantationen bewiesen.

Bevor man Stammzellen verstehen und vollständig verstehen kann, muss man jedoch mit den verschiedenen Terminologien vertraut gemacht werden, die mit dieser wissenschaftlichen Entdeckung verbunden sind. Die Stammzellkultivierung befasst sich mit DNA und deren Codierung. Daher ist es für Studierende oder Personen, die an diesem Bereich interessiert sind, wichtig, zwischen RT-PCR und qPCR zu unterscheiden.

Die umgekehrte Transkriptionspolymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) ist eine der vielen Varianten der Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Diese Labortechnik ist in der Molekularbiologie weit verbreitet, damit die Wissenschaftler durch einen als "Amplifikation" bezeichneten Prozess mehrere Kopien einer bestimmten DNA-Sequenz herstellen können. Der Unterschied zwischen RT-PCR und herkömmlicher PCR besteht darin, dass RNA zuerst in umgekehrter Reihenfolge transkribiert wird sein DNA-Komplement, das die reverse Transkriptase verwendet. Die neue komplementäre DNA, die die umgekehrte Transkription enthält, wird dann unter Verwendung der herkömmlichen PCR oder der Echtzeit-PCR amplifiziert.

Die meisten Studenten, die sich mit diesem Prozess beschäftigen, machen oft den Fehler des Austauschs der reversen Transkriptions-PCR und der Echtzeit-PCR, da die beiden ähnlich gekürzt werden. Um Verwirrung zu vermeiden, kennzeichnen Biologen die Echtzeit-PCR als quantitative Echtzeit-PCR oder qPCR.

QPCR unterscheidet sich stark von der RT-PCR, da qPCR für die Messung der Amplifikation verantwortlich ist, sobald sie auftritt. Man kann sagen, dass die RT-PCR den Amplifikationsprozess startet, während qPCR ihn während des Verfahrens misst.

Quantitative Echtzeit-PCR

QPCR hat die traditionelle Einwegmethode für die Quantifizierung von DNA und RNA tatsächlich revolutioniert, da die Anwendung der qPCR-Methode es Biologen ermöglicht, die Anfangskonzentration der Kerne zu bestimmen, noch bevor die Ergebnisse der Reaktion beobachtet wurden niedergeschrieben.

Die Anwendung von qPCR, das heute als leistungsfähigste und empfindlichste Analysetechnik für genetische Studien gilt, hat sich erheblich erweitert. Gegenwärtig ist es an der quantitativen Genexpressionsanalyse, der Genotypisierung, dem Nachweis von Pathogenen und der Analyse von SNP sowie an RNA-Interferenzmessungen beteiligt.

QPCR wird oft mit dem Prozess der reversen Transkription kombiniert, um die in den Zellen von Geweben, die beobachtet und experimentiert werden, vorhandene Messenger-RNA und MicroRNA zu quantifizieren. Dies ergibt dann einen weiteren sichtbaren Unterschied zwischen den beiden: Die RT-PCR kann für den Amplifikationsprozess verwendet werden, sie muss jedoch zur Quantifizierung mit qPCR fusioniert werden.

Es ist auch bekannt, dass QPCR quantitativer ist, da die Daten mit fortschreitender exponentieller Wachstumsphase (log) der PCR gesammelt werden können. Biologen stellen fest, dass die Menge des Nebenprodukts der PCR direkt proportional zu der Menge an Template-Nukleinsäure ist, die durch qPCR gemessen wird.

Andererseits ist RT-PCR weit davon entfernt, quantitativ zu sein, da die Beobachtung der Intensität der amplifizierten Bande auf einem Gel, das dem eingestellten Standard einer Konzentration folgt, zu einer "semi-quantitativen" Inferenz führen kann.

Zusammenfassung:

1. QPCR und RT-PCR sind beides Begriffe, die in der Biotechnologie verwendet werden und zur Herstellung mehrerer DNA-Kopien verwendet werden.
2.RT-PCR wird verwendet, um die umgekehrte Transkription des DNA-Codes zu amplifizieren; QPCR misst die Verstärkung.
3. RT-PCR dient zur Amplifikation, während qPCR zur Quantifizierung dient.
4. QPCR ist quantitativer Natur, RT-PCR dagegen nicht.