Unterschied zwischen HPLC und HPTLC

Hauptunterschied - HPLC vs. HPTLC
 

Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC ist das HPLC ermöglicht die quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe, während HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe erlaubt.

Die Chromatographie ist eine physikalische Trennmethode, mit der die Komponenten in einer Mischung getrennt und identifiziert werden. Sowohl HPLC als auch HPTLC sind chromatographische Techniken. HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist HPLC?
3. Was ist HPTLC?
4. Side-by-Side-Vergleich - HPLC und HPTLC in Tabellenform
5. Zusammenfassung

Was ist HPLC??

HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. Hierbei handelt es sich um eine Analysetechnik, mit der Komponenten in einer Mischung getrennt, identifiziert und quantifiziert werden. Bei dieser Technik wird die Probe in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst. Dann wird das Lösungsmittel mit der Probe mit einem bestimmten Druck durch eine Pumpe geleitet. Die Pumpe ist mit festem Adsorbens gefüllt. Dann binden einige Komponenten stark an das absorbierende Material, während andere Komponenten locker binden. Dies hat zur Folge, dass die Komponenten unterschiedliche Flussraten durch die Pumpe haben. Daher können die Komponenten leicht getrennt werden.

Abbildung 01: Ein HPLC-System

Das Adsorbensmaterial, das die Pumpe füllt, ist als bekannt stationäre Phase. Das Lösungsmittel mit der gelösten Probe wird als mobile Phase bezeichnet. Die bei dieser Technik verwendete Pumpe wird als Säule bezeichnet. Die Säule ist mit einem Adsorbensmaterial gefüllt, am häufigsten mit Siliciumdioxidpartikeln. Die Größe dieser Teilchen kann im Bereich von 2 bis 50 µm liegen. Der Trennungsprozess wird durch die Zusammensetzung der mobilen Phase und die Temperatur des Systems beeinflusst. Die Wechselwirkungen zwischen der stationären Phase und der Komponente in der Probe können hydrophobe Wechselwirkungen, Dipol-Dipol-Wechselwirkungen, Ionenbindung usw. sein.

Der Betriebsdruck der HPLC ist erheblich höher als bei der herkömmlichen Flüssigkeitschromatographie. Sie liegt bei 50-350 bar. Der Unterschied zwischen Flüssigkeitschromatographie und HPLC besteht darin, dass bei der Flüssigkeitschromatographie die Probe unter Schwerkraft durch die Säule fällt, während bei der HPLC die Probe durch die Säule unter Druck gesetzt wird. Die Größe der Säule und der absorbierenden Teilchen sind im Vergleich zur herkömmlichen Flüssigkeitschromatographie ebenfalls sehr klein. Die durch die HPLC-Technik gegebene Auflösung ist jedoch überlegen.

Was ist HPTLC??

HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie. Es ist die fortgeschrittene und automatisierte Form des traditionellen TLC. Diese Technik sorgt für eine effiziente Auflösung in kurzer Zeit. Bei dieser Analysemethode können die Probe und eine Referenz gleichzeitig analysiert werden, wodurch die Probe mit der Referenz verglichen werden kann. Es bietet eine verbesserte analytische Genauigkeit als andere chromatographische Techniken. Die für die Analyse benötigte Zeit ist kürzer. Die Technik ist eine kostengünstige Technik.

Abbildung 02: Eine Analyse von Lebensmittelfarbstoffen mittels HPTLC

Die HPTLC-Methode ist ein einfaches Verfahren, und der Probenvorbereitungsschritt wird ebenfalls eliminiert (Bei der herkömmlichen TLC wird der Probenvorbereitungsschritt vor der Trennung eingeschlossen. Dieser Schritt beinhaltet die Reinigung und Anreicherung). Das Lösungsmittel kann direkt ohne Vorbehandlung verwendet werden, obwohl andere chromatographische Techniken Vorbehandlungen erfordern, wie Entgasen, Filtrieren usw.

Das in der HPTLC verwendete Adsorbensmaterial ist Siliciumdioxid mit sehr kleinen Teilchengrößen. Bei der herkömmlichen TLC beträgt die Teilchengröße der Kieselsäure 5-20 µm, während sie bei der HPTLC 4-8 µm beträgt. Die Probe wird mit einem Applikator auf die HPTLC-Platte aufgetragen. Es ergibt eine einheitliche und sichere Anwendung. Dann werden die Platten in eine Kammer mit der mobilen Phase gebracht. Die Kammer sollte mit dem Dampf der mobilen Phase gesättigt sein. Nach dem HPTLC-Prozess können die verschobenen Stellen erkannt werden. Beim Erkennen der Flecken auf der Platte verwendet die HPTLC-Technik einen geeigneten UV-Bereich oder eine Jodkammer.

Was ist der Unterschied zwischen HPLC und HPTLC??

HPLC vs. HPTLC
HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie.	HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie.
Technik
Bei der HPLC wird die mobile Phase mit dem Lösungsmittel durch eine mit der stationären Phase gefüllte Säule geleitet.	Bei der HPTLC wird die Probe auf eine TLC-Platte gespottet und in eine Kammer eingebracht, die die mobile Phase enthält; dann kann die Probe zusammen mit der mobilen Phase die Platte nach oben wandern.
Messung
Bei der HPLC werden die Unterschiede zwischen den Flussraten der Komponenten durch die Säule verwendet, um die Komponenten in der Probe zu trennen.	Bei der HPTLC werden die Unterschiede zwischen den Entfernungen, die jede Komponente in der Probe zurücklegt, zur Trennung der Komponenten in der Probe verwendet.
Quantitative Trennung
HPLC ermöglicht die quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe.	HPTLC erlaubt keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe.

Zusammenfassung - HPLC vs HPTLC

HPLC und HPTLC sind zwei chromatographische Techniken. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC besteht darin, dass HPLC eine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht, wohingegen HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht.

Referenz:

1. "Hochleistungsflüssigchromatographie". Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10. April 2018, Hier verfügbar.
2. „HPTLC“. LinkedIn SlideShare, 30. Mai 2011, Hier verfügbar.

Bildhöflichkeit:

1. "HPTLCplatetoMS" Von Kjaergaard in der Wikipedia auf Englisch - Von en.wikipedia an Commons (Public Domain) über übertragen Commons Wikimedia
2. „Hplc“ Von PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAssoziatin (Privatdozentin) Universität HohenheimInstitut für Lebensmittelchemie - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia