Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS

Hauptunterschied - Durchflusszytometrie vs. FACS

Zellen sind im Rahmen der Zelltheorie die grundlegende strukturelle und funktionelle Einheit aller lebenden Organismen. Die Zellsortierung ist eine Methodik, mit der verschiedene Zellen nach physiologischen und morphologischen Merkmalen getrennt werden. Sie können intrazellulär oder extrazellulär sein. Die Wechselwirkung von DNA, RNA und Proteinen wird als intrazelluläre interaktive Eigenschaften betrachtet, während Form, Größe und unterschiedliche Oberflächenproteine ​​als extrazelluläre Eigenschaften betrachtet werden. In der modernen Wissenschaft haben Zellsortiermethoden dazu beigetragen, die verschiedenen Untersuchungen in biologischen Studien und auch bei der Etablierung neuer Prinzipien durch die Erforschung der Medizin zu unterstützen. Die Zellsortierung erfolgt nach verschiedenen Methoden, die sowohl primitiv mit weniger Ausrüstung als auch fortschrittliche technologische Methoden unter Verwendung hochentwickelter Maschinen umfassen. Durchflusszytometrie, fluoreszenzaktivierte Zellsortierung (FACS), Magnetzellenauswahl und Einzelzellensortierung sind die wichtigsten verwendeten Methoden. Durchflusszytometrie und FACS werden entwickelt, um Zellen nach ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden. FACS ist eine spezielle Art der Durchflusszytometrie. Die Durchflusszytometrie ist eine Methodik, die bei der Analyse einer heterogenen Population von Zellen nach unterschiedlichen Zelloberflächenmolekülen, Größe und Volumen verwendet wird, wodurch die Untersuchung einzelner Zellen ermöglicht wird. FACS ist ein Verfahren, bei dem eine Probenmischung von Zellen nach ihren Lichtstreuungs- und Fluoreszenzeigenschaften in zwei oder mehr Behälter sortiert wird. Dies ist das Hauptunterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist Durchflusszytometrie?
3. Was ist FACS?
4. Ähnlichkeiten zwischen Durchflusszytometrie und FACS
5. Side-by-Side-Vergleich - Durchflusszytometrie und FACS in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Durchflusszytometrie??

Die Durchflusszytometrie ist eine Methode, mit der die Expression intrazellulärer Moleküle und der Zelloberfläche untersucht und bestimmt sowie verschiedene Zelltypen definiert und charakterisiert werden. Es wird auch zur Bestimmung des Zellvolumens und der Zellgröße und zur Bewertung der Reinheit der isolierten Subpopulationen verwendet. Dies ermöglicht die Mehrparameterauswertung von Einzelzellen etwa zur gleichen Zeit. Durchflusszytometrie wird zur Messung der Fluoreszenzintensität verwendet, die durch fluoreszenzmarkierte Antikörper erzeugt wird, die dabei helfen, Proteine ​​oder Liganden zu identifizieren, die an assoziierte Zellen binden.

Abbildung 01: Durchflusszytometrie

Im Allgemeinen umfasst die Durchflusszytometrie hauptsächlich drei Subsysteme. Sie sind die Fluidik, die Elektronik und die Optik. In der Durchflusszytometrie stehen fünf Hauptkomponenten zur Verfügung, die zur Zellsortierung verwendet werden. Sie sind eine Durchflusszelle (ein Flüssigkeitsstrom, der zum Transport und zum Ausrichten der Zellen für den optischen Erfassungsprozess verwendet wird), ein Messsystem (kann aus verschiedenen Systemen bestehen, darunter Quecksilber- und Xenonlampen, wassergekühlte Hochleistungskühlgeräte oder Hochleistungskühler) luftgekühlte Laser mit niedriger Leistung oder Diodenlaser), ein ADC; Analog-Digital-Konvertersystem, Verstärkungssystem und Computer zur Analyse. Die Erfassung ist der Prozess, bei dem die Daten mithilfe eines Durchflusszytometers aus den Proben gesammelt werden. Dieser Vorgang wird durch einen Computer vermittelt, der mit dem Durchflusszytometer verbunden ist. Die im Computer vorhandene Software analysiert die vom Durchflusszytometer in den Computer eingegebenen Informationen. Die Software kann auch die Parameter des Experiments anpassen, das das Durchflusszytometer steuert.

Was ist FACS??

Im Rahmen der Durchflusszytometrie, Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung (FACS) ist ein Verfahren, das zum Differenzieren und Sortieren einer Probe einer Mischung biologischer Zellen verwendet wird. Die Zellen sind von zwei oder mehr Behältern getrennt. Das Sortierverfahren basiert auf den physikalischen Merkmalen der Zelle, die Lichtstreuungs- und Fluoreszenzeigenschaften der Zelle einschließen. Dies ist eine wichtige wissenschaftliche Methode, mit der zuverlässige quantitative und qualitative Ergebnisse von Fluoreszenzsignalen erzielt werden können, die von jeder Zelle abgegeben werden. Während des FACS wurde zunächst die vorher erhaltene Mischung von Zellen; eine Suspension wird auf die Mitte eines engen Flüssigkeitsstroms gerichtet, der schnell fließt. Der Flüssigkeitsstrom ist so ausgelegt, dass die Zellen in der Suspension nach dem Durchmesser jeder Zelle getrennt werden. Auf den Suspensionsstrom wird ein Vibrationsmechanismus angewendet, der zur Bildung einzelner Tröpfchen führt.

Abbildung 02: FACS

Das System ist kalibriert, um ein einzelnes Tröpfchen mit einer Zelle zu erzeugen. Unmittelbar vor der Tropfenbildung bewegt sich die Flusssuspension entlang einer Fluoreszenzmeßvorrichtung, die die Fluoreszenzcharakteristik jeder Zelle erfasst. An der Stelle der Bildung von Tröpfchen wird ein elektrischer Ladungsring angeordnet, der vor der Messung der Fluoreszenzintensität eine Ladung in den Ring induziert. Sobald die Tröpfchen aus dem Suspensionsstrom gebildet sind, wird eine Ladung in den Tröpfchen eingeschlossen, die dann in ein elektrostatisches Ablenksystem gelangen. Je nach Gebühr leitet das System die Tröpfchen in verschiedene Behälter um. Die Aufbringungsmethode variiert je nach in FACS verwendeten Systemen. Die in FACS verwendete Ausrüstung ist als fluoreszenzaktivierter Zellsortierer bekannt.

Was ist die Ähnlichkeit zwischen Durchflusszytometrie und FACS??

• Durchflusszytometrie und FACS werden entwickelt, um Zellen nach ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden.

Was ist der Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS??

Durchflusszytometrie vs FACS
Die Durchflusszytometrie ist eine Methodik, die bei der Analyse einer heterogenen Population von Zellen nach unterschiedlichen Zelloberflächenmolekülen, Größe und Volumen verwendet wird, wodurch die Untersuchung einzelner Zellen ermöglicht wird.	FACS ist ein Verfahren, bei dem eine Probenmischung von Zellen nach ihren Lichtstreuungs- und Fluoreszenzeigenschaften in zwei oder mehr Behälter sortiert wird.

Zusammenfassung - Fluss Zytometrie gegen FACS

Die Zelle ist die grundlegende strukturelle und funktionelle Einheit aller lebenden Organismen. Zellsortierung ist der Prozess, bei dem Zellen isoliert und in verschiedene Kategorien aufgrund ihrer intrazellulären und extrazellulären Eigenschaften unterteilt werden. Durchflusszytometrie und FACS sind zwei wichtige Methoden bei der Zellsortierung. Beide Verfahren werden entwickelt, um Zellen nach ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden. Die Durchflusszytometrie ist eine Methodik, die bei der Analyse einer heterogenen Population von Zellen nach unterschiedlichen Zelloberflächenmolekülen, Größe und Volumen verwendet wird, wodurch die Untersuchung einzelner Zellen ermöglicht wird. FACS ist ein Verfahren, bei dem eine Probenmischung von Zellen nach ihren Lichtstreuungs- und Fluoreszenzeigenschaften in zwei oder mehr Behälter sortiert wird. Dies ist der Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACS.

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Referenz:

1. Durchflusszytometrie (FCM) / FACS | Fluoreszenzaktivierte Zellsortierung (FACS). Abgerufen am 22. September 2017. Hier verfügbar
2. Ibrahim, Sherrif F. und Ger van den Engh. „Durchflusszytometrie und Zellsortierung.“ SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. Januar 1970… Zugriff auf 22. September 2017. Hier verfügbar

Bildhöflichkeit:

1. 'Cytometer' By Kierano - Eigenes Werk, (CC BY 3.0) über Commons Wikimedia
2. 'Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS)' B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Entwicklung eines In-vitro-Modellsystems zur Untersuchung der Interaktion von Equus caballus IgE mit seinem hochaffinen FcεRI-Rezeptor (Doktorarbeit), Universität Sheffield,(CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia