Im Zusammenhang mit der Mikroskopie wird das Färben als ein wesentlicher Schritt bei der Verstärkung des Kontrastes des mikroskopischen Bildes betrachtet, insbesondere um unterschiedliche Strukturen in biologischen Geweben hervorzuheben. Bei der Färbung von peripherem Blut- und Knochenmarkausstrichen werden Wright- und Giemsa-Färbungen verwendet. Diese Flecken sind als Romanowsky-Flecken bekannt. Beide Flecken setzen sich aus wichtigen Komponenten zusammen: oxidiertes Methylenblau, Eosin Y und Azur B-Farbstoffe. Die Funktion von Methylenblau und Azur B besteht darin, den Kern mit Farben zu färben, die von blau bis violett variieren. Diese Flecken werden häufig während des Studiums der Morphologie der roten Blutkörperchen und während der Durchführung der differenziellen Anzahl der weißen Blutkörperchen verwendet. Die Diagnose verschiedener Krankheitszustände wie Leukämie könnte durch Romanowsky-Färbeverfahren erreicht werden. Die Wright-Färbung wird verwendet, um Blutzellen zu unterscheiden, die aus einer Mischung von Eosin und Methylenblau-Farbstoffen bestehen. Die Giemsa-Färbung wird während der Färbung von Bakterienzellen sowie menschlichen Zellen verwendet und könnte mit der Wright-Färbung kombiniert werden, um eine Giemsa-Wright-Färbung zu entwickeln. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Giemsa-Färbung und Wright-Färbung.
Giemsa-Färbung wird für die zytogenetische und histopathologische Diagnostik von Malariaparasiten und anderen parasitären Erkrankungen verwendet. Giemsa-Färbung kann auch als Grundfärbung bei der Klassifizierung von Lymphomen in der Klassifizierung von Kiel angesehen werden. Giemsa-Färbung wird für das Giemsa-Banding benötigt, das allgemein als G-Banding bekannt ist. Das Giemsa-Banding wird zum Anfärben von Chromosomen und auch zur Erstellung von Karyogrammen verwendet. Chromosomenanomalien wie Translokationen und Umlagerungen werden durch Giemsa-Banding identifiziert. Giemsa-Färbung wird in der Histologie aufgrund seiner hochwertigen Anfärbung der Kernmembran und des Chromatins, der Metachromasie einiger Zellkomponenten und der unterschiedlichen Eigenschaften der zytoplasmatischen Färbung je nach Zelltyp verwendet.
Abbildung 01: Giemsa Stain
Die Giemsa-Lösung enthält Methylenblau, Azure B und Eosin, und der Fleck wird kommerziell unter Verwendung von Giemsa-Pulver hergestellt. Die Stabilität des Farbstoffs hängt von Methylenazur und seiner Mischung zusammen mit Methylenblau ab, das ein Eosinat bildet. Die Giemsa-Färbung ist besonders für Phosphatgruppen im DNA-Strang und wird an die Bereiche gebunden, in denen eine große Menge an Adenin-Thymin-Bindungen vorhanden ist. Bei der Giemsa-Färbemethode wird eine dünne Schicht der Probe zunächst zusammen mit wenigen Tropfen reinen Methanols für etwa 30 Sekunden auf einen Objektträger aufgebracht. Dann wird der Objektträger für etwa 20 bis 30 Minuten in 5% ige Giemsa-Färbelösung getaucht, die frisch zubereitet wird. Zum Schluss wird der Objektträger mit Leitungswasser gewaschen und trocknen gelassen. Giemsa-Fleck ist als Differentialfleck bekannt, da der Wright-Giemsa-Fleck entsteht, wenn der Wright-Fleck mit Giemsa kombiniert wird. Daher kann es zur Untersuchung pathogener Bakterien verwendet werden, die an menschliche Zellen anhaften. Hier werden die menschlichen Zellen und die Bakterienzellen defekt gefärbt und es werden jeweils violette und rosafarbene Farben beobachtet.
Wrights Fleck ist nach James Homer Wright benannt, der den Romanowsky-Fleck modifizierte. Die Flecken von Wright werden verwendet, um Blutzellentypen zu unterscheiden, da zwischen Blutzellentypen unterschieden werden kann. Infolgedessen können Infektionen durch Beobachtung der Anzahl der weißen Blutkörperchen diagnostiziert werden. Der Fleck ist eine Mischung aus rotem Eosin und Methylenblau-Farbstoffen. Wrights Fleck wird verwendet, um Urinproben, periphere Blutausstriche und Knochenmark-Aspirate unter Lichtmikroskopen zu färben und zu beobachten. Wrights Färbung wird bei der Färbung von Chromosomen in der Zytogenetik verwendet, um die Diagnose mehrerer Krankheiten und Syndrome zu fördern. Die mit Wright-Flecken angefärbten Urinproben identifizieren die Eosinophilen, was auf eine Infektion des Harnwegs hindeutet.
Abbildung 02: Wright-Färbung
Beim Wright-Fleckenverfahren wird ein luftgetrockneter Blutfilm hergestellt, und der Wright-Fleck wird aufgetragen und 3 Minuten stehen gelassen. Dann wird der Puffer einer gleichen Menge des Flecks zugegeben, vorsichtig gemischt und 5 Minuten stehen gelassen. Der Objektträger wird horizontal gehalten und mit neutralem destilliertem Wasser gut gewaschen. Zuletzt wird es getrocknet und unter dem Mikroskop betrachtet.
Giemsa Fleck gegen Wright Fleck | |
Die Giemsa-Färbung ist eine differenzielle Färbetechnik, die hauptsächlich zur Färbung von Bakterienzellen und auch von menschlichen Zellen verwendet wird. | Bei der Wright-Färbung handelt es sich um eine differenzielle Färbetechnik, die hauptsächlich bei der Färbung von Blutausstrichen, Urinproben und Aspiraten von Knochenmark verwendet wird. |
Die Färbung ist eine wesentliche Labortechnik, die während der Mikroskopie eingesetzt wird, um den Kontrast des mikroskopischen Bildes zu verbessern. Giemsa-Färbung und Wright-Färbung zusammen als Romanowsky-Färbungen bezeichnet, umfassen die Durchführung von differenziellen weißen Blutkörperchen und das Studium der Zellmorphologie roter Blutkörperchen. Oxidierte Methylenblau-, Eosin-Y- und Azur-B-Farbstoffe sind die wichtigen Komponenten von Romanowsky-Flecken. Die Giemsa-Färbung wird hauptsächlich während der Färbung von Bakterienzellen verwendet, kann aber auch für menschliche Zellen verwendet werden. Die Wright-Färbung wird häufig während der Färbung von Blutausstrichen, Urinproben und Aspiraten von Knochenmark verwendet. Dies ist der Unterschied zwischen Giesma-Fleck und Wright-Fleck.
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1. "Trypanosoma-Evansi-Ratte-Blut-Giemsa-Fleck" Von Alan R Walker - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "Mastzelle, Knochenmark-Aspirat, Wright-Färbung (5916735712)" Von Ed Uthman aus Houston, TX, USA - Mastzelle, Knochenmark-Aspirat, Wright-StainUploaded by CFCF (CC BY 2.0) über Commons Wikimedia