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Unterschied zwischen Grammfleck und Säure schnell

Mikrobiologie
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Hauptunterschied - Gram Stain vs Acid Fast
  

Bakterien sind sehr kleine Mikroorganismen. Sie sind transparent, und ihre Erkennung ist unter lebenden und verschmutzten Bedingungen schwierig. Daher werden verschiedene Färbeverfahren entwickelt, um den Nachweis von Bakterien zu erleichtern. Es gibt drei Hauptarten von Färbetechniken: einfache Färbung, differenzielle Färbung und Strukturfärbung. Differenzielle Färbung ist eine Technik, bei der mehrere Bakterien zur Differenzierung von Bakterien verwendet werden. Gram-Flecken und säurefeste Flecken werden am häufigsten als Differenzflecken bezeichnet. Die Gramfärbung ist eine differenzielle Färbemethode, bei der Bakterien in zwei Gruppen unterteilt werden, die als grampositive Bakterien und gramnegative Bakterien bezeichnet werden. Die säurefeste Färbung ist eine Differenzfärbung, mit der säurefeste Organismen wie Mycobacterium aus nicht sauren schnellen Organismen identifiziert werden können. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Gram-Färbung und Acid Fast-Färbung.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist Gram Fleck? 
3. Was ist Acid Fast?
4. Ähnlichkeiten zwischen Gram-Färbung und Säure-Schnell
5. Seite an Seite Vergleich - Gram Stain vs Acid Fast in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Gram Fleck??

Die Gramfärbung ist eine wichtige Differenzierungsfärbungstechnik, die zur Identifizierung von Bakterien in der Mikrobiologie verwendet wird. Diese Technik wurde 1884 vom dänischen Bakteriologen Hans Christian Gram eingeführt. Bei der Gramfärbung werden Bakterien in zwei Hauptgruppen mit den Namen grampositiv und gramnegativ eingeteilt, die für die Klassifizierung und Identifizierung von Bakterien von großer Bedeutung sind. Mikrobiologen führen die Gram-Färbung als ersten Schritt der bakteriellen Charakterisierung während ihrer Studien durch.

Bakterien werden nach den Unterschieden in ihrer Zellwand gruppiert. Grampositive Bakterien bestehen aus einer dicken Peptidoglycan-Schicht in ihrer Zellwand, während Gram-negative Bakterien aus einer dünnen Peptidoglycan-Schicht in ihrer Zellwand bestehen. Das Ergebnis der Grammfärbung basiert auf dem Unterschied in der Dicke der Peptidoglycanschicht der Zellwand.

Die Grammfärbung wird unter Verwendung von vier verschiedenen Reagenzien durchgeführt. Primärfärbung, Beizmittel, Entfärbungsmittel und Gegenfärbung. Kristallviolett und Safranin werden als Primär- bzw. Gegenfärbemittel verwendet, während Gramm Jod und 95% Alkohol als Beizmittel bzw. Entfärbungsmittel verwendet werden. Die grundlegenden Schritte der Grammfärbung sind wie folgt;

  1. Ein bakterieller Abstrich wird auf einem sauberen Objektträger vorbereitet, hitzefixiert und gekühlt.
  2. Der Abstrich wird 1 - 2 Minuten mit Kristallviolett überflutet.
  3. Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült, um überschüssige Flecken zu entfernen.
  4. Gramm Jod wird 1 Minute lang auf den Abstrich aufgetragen.
  5. Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült
  6. Der Abstrich wird mit 95% igem Alkohol 2 - 5 Sekunden lang gewaschen und mit langsam fließendem Leitungswasser gespült.
  7. Der Abstrich wird 1 Minute lang mit Safranin kontaminiert
  8. Der Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült, getrocknet und unter dem Mikroskop beobachtet.

Am Ende der Grammfärbung werden gramnegative Bakterien in rosa Farbe beobachtet, während grammpositive Bakterien in violetter Farbe beobachtet werden.

Abbildung 01: Gram-negative und grampositive Bakterien

Das Ergebnis der Grammfärbung wird durch die Dicke der Peptidoglykanschicht in ihrer Zellwand bestimmt. Während des Entfärbungsschrittes lassen sich Primärfleck und Beizmittel leicht von den gramnegativen Bakterien entfernen und werden farblos, da sie eine dünne Peptidoglycanschicht aufweisen. Der Primärfleck wird in den grampositiven Bakterien zurückgehalten, da sie eine dicke Peptidoglycanschicht aufweisen. Die Gegenfärbung ist aufgrund der Zurückhaltung der Primärfärbung für grampositive Bakterien nicht wirksam. Somit werden Gramm-positive Bakterien in der primären Verfärbungsfarbe, dh in der Purpurfarbe, sichtbar. Die Gegenfärbung färbt die gramnegativen Bakterien und sie werden in Pick-Farbe, der Safranin-Farbe, sichtbar. Daher ist es einfach, Bakterien durch Grammfärbung in zwei Gruppen zu kategorisieren, und sie ist für die Differenzierung und Identifizierung von Bakterien wertvoll.

Was ist Acid Fast??

Säurefestigkeit ist eine physikalische Eigenschaft bestimmter Bakterien, insbesondere ihre Beständigkeit gegen Entfärbung durch Säuren während der Färbevorgänge. Sobald sie gefärbt sind, widerstehen diese Organismen verdünnten Säure- oder Ethanol-Entfärbungsverfahren, die in vielen Färbeprotokollen üblich sind. Daher wird diesen Organismen der Name "säurefest" gegeben. Diese Eigenschaft zeigt sich aufgrund eines hohen Gehalts an wachsartigem Material (Mykolsäure) in ihren Zellwänden. Dieser Test ist entscheidend für die Identifizierung von Mycobacterium tuberculosis.

Abbildung 2: Saure schnelle Mykobakterien

Diese säurefeste Färbung wurde 1882 von Paul Ehrlich entwickelt. Ehrlichs säurefeste Technik wurde von Ziehl-Neelsen modifiziert und wird jetzt häufiger eingesetzt. Das Verfahren zur schnellen Säurefärbung umfasst drei verschiedene Reagenzien. Carbol Fuschin wird als primärer Fleck verwendet. Säurealkohol wird als Entfärbungsmittel verwendet. Methylenblau wird als Gegenfärbung verwendet. Das Färbeverfahren wird wie folgt durchgeführt.

  1. Der Primärfleck (Carbolfuchsin) wird auf die fixierte Probe auf dem Objektträger aufgetragen (alle Zellen werden rot gefärbt)..
  2. Der Objektträger wird 5 Minuten lang durch Dämpfen erhitzt, wodurch die Flecken ordnungsgemäß in die Zellen getrieben werden.
  3. Dann wird die Entfärbungslösung zugegeben (dies entfernt den roten Farbstoff von allen Zellen außer den säurefesten Bakterien)..
  4. Methylenblau wird als Gegenfärbung zugesetzt (färbt alle entfärbten Bakterienzellen).
  5. Saure Fast-Bakterien bleiben rot, während nicht-saure Fast-Bakterien blau gefärbt werden.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Gram Fain und Acid Fast?

  • Gram-Färbung und Säurefest sind zwei unterschiedliche Färbeverfahren.
  • Beide Techniken kategorisieren Bakterien in zwei Gruppen.
  • Beide Techniken verwenden zwei Flecken und eine Entfärbung.

Was ist der Unterschied zwischen Gram Fain und Acid Fast?

Grammfleck gegen saure schnelle
Bei der Gramfärbung handelt es sich um eine differenzielle Färbetechnik, bei der Bakterien in zwei Gruppen grampositive Bakterien und gramnegative Bakterien unterteilt werden. Säurefeste Verfärbung ist eine Differenzfärbung, mit der säurefeste Organismen von nicht sauren schnellen Organismen identifiziert werden können.
Primärfleck
Kristallviolett ist die häufig verwendete Primärfärbung bei der Grammfärbung. Carbolfuchsin ist der primäre Farbstoff, der in säurefesten verwendet wird.
Entfärbungsmittel
95% Alkohol wird als Entfärbungsmittel in Grammfärbung verwendet. Säurealkohol wird in säurefest als Entfärbungsmittel eingesetzt.
Gegenfleck
Bei der Gramfärbung wird Safranin als Gegenfärbung verwendet. Bei der sauren schnellen Verfärbung wird Methylenblau als Gegenfärbung verwendet.
Überwachung
Gram-negative Bakterien werden in Pick-Farbe und Gramm-positive Bakterien in Purpurfarbe beobachtet. Saure Fast-Bakterien werden in roter Farbe und nicht-saure Fast-Bakterien in blauer Farbe beobachtet.

Zusammenfassung - Gram Stain vs Acid Fast

Die Visualisierung von Mikroorganismen im lebenden Zustand ist schwierig. Daher werden biologische Flecken und Färbeverfahren ausgiebig verwendet, um ihre Eigenschaften zu untersuchen. Differenzielle Färbung ist eine Art von Färbetechnik, die zur Differenzierung von Bakterien verwendet wird. Gram-Färbung und Säure-schnelle Färbung sind zwei unterschiedliche Färbeverfahren. Die Gramfärbung unterscheidet gramnegative Bakterien und grampositive Bakterien anhand der Dicke ihrer Zellwände. Durch saure Fast-Färbung werden saure Fast-Bakterien von nicht-sauren Fast-Bakterien anhand des Mykolsäuregehalts in der Zellwand unterschieden. Dies ist der Unterschied zwischen säurefester und Grammfärbung.

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Verweise:

1. Aryal, Sagar „Acid-Fast-Fain-Prinzip, Vorgehensweise, Interpretation und Beispiele.“ Hinweise zur Online-Mikrobiologie. N., 08. Mai 2017. Web. Hier verfügbar. 20. Juli 2017.
2. Differenzielle Flecken zur Identifizierung von Bakterien: Gramm, säurefest und Endospore. N.p., n. D. Netz. Hier verfügbar. 20. Juli 2017.

Bildhöflichkeit:

1. "Lymphknoten - atypische mykobakterielle Infektion (MAI) - AFB-Färbung" von Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) über Flickr
2. „Gramm Fleck 01“ von Y Tambe - Y Tambe's Datei (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia

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