Immunzytochemie (ICC) und Immunhistochemie (IHC) sind zwei weit verbreitete Techniken in der Molekulardiagnostik, die das Auftreten sowohl nichtübertragbarer Krankheiten als auch übertragbarer Krankheiten anhand der auf Zellen vorhandenen molekularen Marker identifizieren und bestätigen. Der Hauptunterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie ist das Molekül, das bei diesen Techniken als Analyseverfahren verwendet wird. Bei der ICC werden mit Markern wie Fluoreszenz konjugierte Primär- und Sekundärantikörper verwendet, während für die diagnostischen Bestimmungen IHC-, monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet werden.
1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist Immunzytochemie?
3. Was ist Immunhistochemie?
4. Ähnlichkeiten zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie
5. Side-by-Side-Vergleich - Immunzytochemie vs. Immunhistochemie in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
ICC verwendet primäre und sekundäre Antikörper, die an Marker wie fluoreszierende Marker oder Enzyme gebunden sind, und ist eine leistungsfähige Nachweismethode zum Nachweis von Antigenen auf Zielzellen, bei denen es sich entweder um infektiöse Zellpartikel oder um krebsartige Tumorzellen handeln kann. Drei Arten von Kontrollen sind für die Immunzytochemie erforderlich.
Abbildung 01: Immunzytochemie markiert einzelne Proteine in Zellen (hier ist Tyrosinhydroxylase in den Axonen sympathischer autonomer Neuronen grün dargestellt).
Die primäre Antikörperkontrolle ist für jeden neuen Antikörper spezifisch und kann nicht für jedes Experiment wiederholt werden. Die sekundäre Antikörperkontrolle basiert auf dem im Experiment verwendeten primären Antikörper und ist in jedem Experiment enthalten. Die Kennzeichnungssteuerung ist enthalten, wenn eine Bedingung des Verfahrens geändert wird, die Probe geändert wird oder wenn eine unerwartete Kennzeichnung gefunden wird.
Die zwei Hauptanwendungen von ICC sind der Radio Immuno Assay (RIA) und der Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Der am häufigsten verwendete Antikörper ist das Immunglobulin G.
In der Immunhistochemie enthält die Quellprobe monoklonale und polyklonale Antikörper, um das Vorhandensein von Antigenen in fremden Zellen zu bestimmen. Diese Technik basiert auf der spezifischen Reaktion der Antigen-Antikörper-Bindung. Die beim Nachweis verwendeten Antikörper können mit verschiedenen Markern markiert werden; Dies können Fluoreszenzmarker, radioaktiv markierte Marker oder chemische Marker sein. Durch Erleichterung in vitro Bindung zwischen dem Antigen und dem Zielantikörper kann die Anwesenheit oder Abwesenheit eines bestimmten Proteins einer Zelle bestimmt werden.
Abbildung 02: Immunhistochemische Färbung normaler Nieren mit CD10
Derzeit sind Wissenschaftler an der Entwicklung von Zielantikörpern für spezifische Antigene in Zellen beteiligt, die sich entweder als maligne Tumorzellen oder als Antigene in infektiösen Agenzien wie HIV entwickeln können.
Immunzytochemie (ICC) vs Immunhistochemie (IHC) | |
ICC verwendet primäre und sekundäre Antikörper-gebundene Marker wie fluoreszierende Marker oder Enzyme und ist eine leistungsfähige Nachweismethode zum Nachweis von auf Zielzellen vorhandenen Antigenen. | IHC ist eine Methode, bei der monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet werden, um das Vorhandensein von Antigenen zu bestimmen, bei denen es sich um spezielle Proteinmarker auf den Zelloberflächen handelt. |
Beispielquelle | |
In ICC werden Proben aus histologisch in dünne Abschnitte bearbeiteten Geweben entnommen. | IHC verwendet Proben, die aus Zellen bestehen, die in einer Monoschicht gezüchtet wurden, oder Zellen in Suspension, die auf einem Objektträger abgelagert werden. |
Probenverarbeitung | |
Bei der ICC sollten Zellen durchlässig sein, um das Eindringen von Antikörpern in die intrazellulären Ziele zu erleichtern. | In der IHC werden die Zellen vor dem Anfärben formalinfixiert und in Paraffin eingebettet. |
Molekulardiagnostik wird verwendet, um das Auftreten sowohl von nichtübertragbaren Krankheiten als auch von übertragbaren Krankheiten basierend auf den auf Zellen vorhandenen molekularen Markern zu identifizieren und zu bestätigen. Molekulare Marker können Proteine oder Sequenzen von DNA oder RNA sein; Die Entwicklung von Technologien wie ICC und IHC hat Wissenschaftlern den Weg bereitet, die Krankheit und ihre Ursache frühzeitig zu erkennen. Sowohl die ICC als auch die IHC hängen von den spezifischen Reaktionen zwischen Antikörper und Antigen ab, obwohl es sich um die Probenquelle handelt. Der Hauptunterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie ist die Probenaufbereitung der beiden Verfahren.
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1. "Immunhistochemie" von Swharden - eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. “Kidney cd10 ihc” von Nephron - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia