Unterschied zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie

Hauptunterschied - In-Situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
 

Die Diagnose von Krebs und Infektionskrankheiten ist ein populärer Trend, bei dem neuartige auf Proteomik und Genomik basierende Techniken zur Identifizierung von Tumoren oder infektiösen Zellen, ihrer Proliferation und der Orte der Zellentwicklung und zur Analyse der genetischen Grundlage der übertragbaren und nicht übertragbaren Krankheiten verwendet werden. Dies wird zu einer genauen Verarbeitung und Entwicklung von Medikamenten führen und maßgeschneiderte Therapien für Krankheiten entwickeln. In-situ-Hybridisierung (ISH) und Immunhistochemie (IHC) sind zwei solcher weit verbreiteter Techniken in der Krebsbiologie. Der Hauptunterschied zwischen In-situ-Hybridisierung und Immunochemie liegt in den Molekülen, die im Analyseverfahren verwendet werden. In ISH werden die Nukleinsäuresonden in der Analyse verwendet, während in IHC monoklonale und polyklonale Antikörper für die diagnostischen Bestimmungen verwendet werden.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist In-Situ-Hybridisierung?
3. Was ist Immunhistochemie?
4. Ähnlichkeiten zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie
5. Side-by-Side-Vergleich - In-Situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist In-Situ-Hybridisierung (ISH)?

In situ-Hybridisierung ist eine Nukleinsäurehybridisierungstechnik, die direkt an einem Abschnitt oder Gewebeabschnitt, im gesamten Gewebe oder in Zellen durchgeführt wird. Die Technik hängt von der Theorie der komplementären Basenpaarung von Watson Crick ab, was entweder zu DNA-DNA-Hybriden oder DNA-RNA-Hybriden führt, die mutierte Gene nachweisen oder das erforderliche interessierende Gen identifizieren können. Einzelstrang-DNA-Sequenzen, doppelsträngige DNA-Sequenzen, einzelsträngige RNA-Sequenzen oder synthetische Oligonukleotidsequenzen werden während der Hybridisierungstechnik als Sonden verwendet, und diese Sonden werden an ihrem 5'-Ende mit einem radioaktiven Phosphor für Identifikationsverfahren nach Autoradiographie oder unter Verwendung von Fluoreszenzfarbstoffen markiert . Es gibt verschiedene Arten von ISH-Techniken, die auf der Art der verwendeten Sonde und der verwendeten Visualisierungstechnik basieren.

Abbildung 01: Fluoreszierende In-Situ-Hybridisierung

Es gibt viele Anwendungen von ISH, hauptsächlich in der molekularen Diagnostik von Infektionskrankheiten, um das Vorhandensein von Krankheitserregern zu identifizieren und den Krankheitserreger mittels molekularer Diagnostik zu bestätigen. Es wird auch in den Bereichen Entwicklungsbiologie, Karyotypisierung und phylogenetische Analyse sowie physikalische Kartierung von Chromosomen eingesetzt.

Was ist Immunhistochemie (IHC)?

In der IHC-Technik ist das analysierte Hauptmolekül das Antigen. Während der IHC werden monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet, um das Vorhandensein von Antigenen bei Infektion oder den Status der malignen Zellproliferation zu bestimmen. Die Technik basiert auf der Antigen-Antikörper-Bindung, und für diese Technik werden Enzymmarkierungen verwendet. Eine solche Anwendung ist der ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Die Marker können auch fluoreszenzmarkierte Antikörper oder radioaktiv markierte Antikörper sein.

Abbildung 02: Immunhistochemie

IHC wird häufig zur Erkennung von Krebszellen eingesetzt. Die diagnostischen Verfahren zielen auf die auf den Tumorzellen vorhandenen Antigene ab, um den Tumor zu identifizieren und zu charakterisieren. Das gleiche Verfahren wird zur Diagnose von Infektionserregern verwendet. Monoklonale und polyklonale Antikörper werden auch verwendet, um verschiedene Genprodukte zu analysieren, indem die Antikörper-Antigen-Bindungsreaktion zwischen dem gewünschten Protein und dem verabreichten synthetischen Antikörper ermöglicht wird.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie?

• ISH und IHC sind hochspezifische Reaktionen.
• Beide Techniken sind sehr genau.
• Beide Techniken können in der Diagnostik bei Krebs und Infektionskrankheiten eingesetzt werden.
• Diese Techniken werden in sterilen In-vitro-Umgebungen durchgeführt.
• Beides sind schnelle Techniken, die reproduzierbare Ergebnisse liefern.
• ISH und IHC verwenden Nachweismethoden wie Radiomarkierung und Fluoreszenztechniken.

Was ist der Unterschied zwischen In-Situ-Hybridisierung und Immunhistochemie??

In situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
ISH ist eine Nukleinsäurehybridisierungstechnik, die direkt an einem Abschnitt oder Abschnitt eines Gewebes oder des gesamten Gewebes durchgeführt wird.	IHC ist eine Technik, bei der monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet werden, um das Vorhandensein von Antigenen zu bestimmen, bei denen es sich um spezielle Proteinmarker auf den Zelloberflächen handelt.
Art der analysierten Biomoleküle
ISH analysiert Nukleinsäuren.	IHC analysiert Protein-Antigene.
Grundlage der biochemischen Reaktion
Bei dieser Technik tritt eine komplementäre Basenpaarung zwischen DNA-DNA oder DNA-RNA auf.	Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen sind an der Immunhistochemie beteiligt.
Enzymgebundene Nachweismethoden
Enzymgebundene Nachweismethoden können in ISH nicht verwendet werden.	Enzymgebundene Nachweismethoden können in der IHC verwendet werden.

Zusammenfassung - In-Situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie

Molekulardiagnostik sind schnelle und bestätigende Verfahren, die zur Identifizierung einer nicht übertragbaren Krankheit wie Krebs oder einer übertragbaren Krankheit wie HIV oder Tuberkulose verwendet werden können, basierend auf den molekularen Markern auf den Zellen, die zur Manifestation der Krankheit führen. Molekulare Marker können in Form von exprimierten Proteinen oder auf genetischer Ebene vorliegen, auf deren Basis verschiedene neue Techniken eingeführt werden, um die Effizienz zu steigern und weniger aufwendig sind, obwohl diese Techniken mit hohen Kosten verbunden sind. Daher hängt ISH von der DNA-DNA- oder DNA-RNA-Hybridbildung ab, und die IHC hängt von den spezifischen Reaktionen zwischen Antikörper und Antigen ab. Dies ist der Unterschied zwischen In-situ-Hybridisierung.

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Verweise:

1. Duraiyan, Jeyapradha et al. "Anwendungen der Immunhistochemie." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, Hier verfügbar. Abgerufen am 24. August 2017.
2. "In situ Hybridization (ISH)". Nationales Zentrum für Biotechnologie-Informationen, US-amerikanische Nationalbibliothek für Medizin, Hier verfügbar. Abgerufen am 24. August 2017.

Bildhöflichkeit:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" Von MrMatze - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. “Immunohistochemicalstaining2” von Imoen in der englischsprachigen Wikipedia (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia