Unterschied zwischen Einfügungs- und Ersatzvektoren

Das Hauptunterschied Zwischen Insertions- und Ersatzvektoren besteht die Fähigkeit, dass der Insertionsvektor moderate Längen von Fremd-DNA einführen kann, während der Ersatzvektor die Fähigkeit hat, größere Längen von Fremd-DNA aufzunehmen.

Phagenvektoren sind die zur Klonierung verwendeten Bakteriophagen. Es gibt zwei Arten von Phagenvektoren. Sie sind Insertionsvektor und Ersatzvektor. Alle Phagenvektoren bestehen auch aus nicht essentiellen Genen. Diese Gene müssen jedoch aus den Phagen entfernt werden, um neue fremde DNA-Inserts zu ermöglichen.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was sind Insertionsvektoren?
3. Was sind Ersatzvektoren?
4. Ähnlichkeiten zwischen Insertions- und Ersatzvektoren
5. Side-by-Side-Vergleich - Insertion vs. Ersatzvektoren in Tabellenform
6. Zusammenfassung

Was ist ein Einfügungsvektor??

Zunächst ist der Insertionsvektor die einfachste Form von Lambda-Klonierungsvektoren. Tatsächlich handelt es sich um einen Typ eines Phagenvektors, der eine einzigartige Restriktionsstelle in das Vektorgenom an der Position optionaler DNA eingeführt hat. Darüber hinaus bleibt die Phagen-DNA ohne Entfernung. Diese Nichtentfernung der Phagen-DNA begrenzt die Größe der Inserts (Fremd-DNA), die innerhalb des Vektors kloniert werden sollen. Darüber hinaus sind diese Vektoren für die Klonierung und Expression von cDNA nützlich. Beispiele für diesen Vektor sind GT10, GT11 und Zap.

Abbildung 01: Lambda-Phage

Der Einfügungsvektor besteht aus einer einzelnen Erkennungsstelle. Die Hauptfunktion dieses Vektors besteht darin, cDNA-Bibliotheken zu entwickeln, die von eukaryotischen mRNA-Sequenzen stammen. Darüber hinaus kann es nur Längen fremder DNA aufnehmen, die zwischen 05 und 11 kb liegen. Es besitzt auch eine einzigartige Spaltstelle für die Insertion von Fremd-DNA.

Was sind Ersatzvektoren??

Ersatzvektor oder Substitutionsvektor ist ein Typ eines Phagenvektors, der aus der Entfernung einer mittleren "Füllstofffragmentregion" von Phagen-DNA entwickelt wurde. Die gewünschte Fremd-DNA-Insertion ersetzt die Phagen-DNA.

Abbildung 02: Ersatzvektor

Ersatzvektoren sind wichtig für die Erstellung genomischer Bibliotheken wie EMBL4 und Charon40. Diese Vektoren können eine größere Länge von Fremd-DNA aufnehmen, die zwischen 08 und 24 kb lang ist. Die Füllerregion besteht auch aus einem Gen, das den Phagenvektor in einem bakteriellen Wirt nicht lebensfähig macht.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Einfügungs- und Ersatzvektoren??

  • Insertions- und Ersatzvektoren sind Phagenvektoren.
  • Beide Vektoren nehmen fremde DNA-Inserts auf.
  • Beide sind hilfreich beim Erstellen von DNA-Bibliotheken.

Was ist der Unterschied zwischen Einfügungs- und Ersatzvektoren??

Insertion vs. Ersatzvektoren

Der Insertionsvektor ist ein Typ eines Phagenvektors, bei dem eine Restriktionsstelle in das Phagengenom an der Stelle optionaler DNA eingeführt ist. Der Ersatzvektor ist ein Typ eines Phagenvektors, der aus der Entfernung einer mittleren "Füllstofffragmentregion" von Phagen-DNA entwickelt wurde
Größe der Insert-Fragmente
05-11 kb Länge 08-24 kb Länge
Füllfragment
Kein Füllstofffragment Das Füllfragment wird durch eine fremde Einlage ersetzt
  Funktion
Wichtig zum Erstellen von cDNA-Bibliotheken Wichtig beim Erstellen von Genombibliotheken
Beispiele
GT10, GT11 und Zap sind Beispiele EMBL4 und Charon40 sind Beispiele
Spaltstelle
Eine einzigartige Spaltstelle ist vorhanden Die Spaltstelle enthält Gene, die für den lytischen Zyklus nicht wesentlich sind

Zusammenfassung - Insertion vs. Ersatzvektoren

Sowohl Einfügungs- als auch Ersatzvektoren sind zwei Arten von Phagenvektoren. Beide Vektoren haben Restriktionsstellen, die die Aufnahme neuer fremder DNA-Inserts erleichtern. Insertionsvektoren sind wichtig beim Erstellen von cDNA-Bibliotheken, während Ersatzvektoren beim Erstellen von Genombibliotheken wichtig sind. Darüber hinaus können Insertionsvektoren DNA-Inserts mit einer moderaten Länge aufnehmen. Ersatzvektoren können jedoch höhere Längen von Fremd-DNA-Inserts aufnehmen. Insgesamt ist dies der entscheidende Unterschied zwischen Einfügungs- und Ersatzvektoren.

Referenz:

1. Hasty, P, et al. "Effizienz der Insertion versus Austauschvektor-Targeting variiert an verschiedenen chromosomalen Loci." Molekulare und Zelluläre Biologie, US-amerikanische Nationalbibliothek für Medizin, Dezember 1994, Hier verfügbar.
2. "Lambda-Insertionsvektoren". Biologie 335 Vorlesungsunterlagen: Lambda-Vektoren, Hier verfügbar.
3. "Ersatzvektor". Ersatzvektor - Terminologie der Molekularbiologie für Ersatzvektor - GenScript, Hier verfügbar.

Bildhöflichkeit:

1. "Lambda Phage" Von Lizanne Koch - eigene Arbeit mit ChemBioDraw (Public Domain) über Commons Wikimedia