Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran

Das Hauptunterschied zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran ist das Nitrocellulosemembran hat eine hohe Affinität für die Proteinbindung, wohingegen die Nylonmembran eine hohe Affinität für die Nukleinsäurebindung aufweist. Darüber hinaus binden hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nitrocellulosemembranen, während ionische, hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nylonmembranen binden

Nitrocellulose und Nylonmembran sind zwei Arten von Membranen, auf die die Makromoleküle aus dem Gel übertragen werden. Nitrocellulosemembranen können jedoch auch zum Binden von DNA und RNA verwendet werden.

Wichtige Bereiche

1. Was ist eine Nitrocellulosemembran?
     - Definition, Struktur, Bindungsmechanismus, Vorteile 
2. Was ist eine Nylonmembran?
     - Definition, Struktur, Bindungsmechanismus, Vorteile 
3. Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran?
     - Überblick über allgemeine Funktionen
4. Was ist der Unterschied zwischen Nitrozellulose und Nylonmembran?
     - Vergleich der wichtigsten Unterschiede

Schlüsselbegriffe

Affinität, Biodyne A, Biodyne B, Nitrocellulose, Nukleinsäuren, Nylon, Porengröße, Proteine

Was ist eine Nitrocellulosemembran?

Nitrocellulosemembran ist aufgrund der hohen Proteinbindungsaffinität eine übliche Matrix, die im Western Blotting verwendet wird. Es kann jedoch zum Nachweis von Nukleinsäuren neben immobilisierten Proteinen und Glykoproteinen verwendet werden. Die Immobilisierung der Makromoleküle erfolgt hauptsächlich durch hydrophobe Wechselwirkungen. Wasserstoffbrücken werden auch zwischen den Nitrogruppen der Membran und den Aminosäureseitenketten der Proteine ​​gebildet. Die Proteinimmobilisierung wird bei den hohen Salz- und Methanolkonzentrationen hoch sein.

Abbildung 1: Prinzip des Blots

Nitrocellulosemembranen sind in 100% reinen Formen von Nitrocellulose mit einer großen Oberfläche erhältlich, die einheitlich ist. Die verfügbaren Vorgrößen sind 0,2 μm und 0,45 μm. Die kleine Porengröße ist besser für die Bindung mit kleinen Proteinen (<14 kDa). The binding and retaining capacity of proteins is 80-250 μg/cm². Die vormontierten Membranen sind gebrauchsfertig. Einer der Hauptvorteile von Nitrocellulosemembranen ist der sehr niedrige Hintergrund, da er leicht blockiert werden kann. Die geträgerten Nitrocellulosemembranen können abgestreift und erneut gereinigt werden.

Was ist eine Nylonmembran?

Nylonmembran ist eine weit verbreitete Matrix für die Bindung von Nukleinsäuren. Nylonmembranen sind mechanisch fester als Nitrozellulosemembranen. Die zwei Haupttypen von Nylonmembranen, die beim Blotting verwendet werden, sind Biodyne A und Biodyne B. Die Porengröße beider Typen beträgt 0,45 µm. Sie sind beständig gegen Hitze und Lösungsmittel. Sie werden auch nicht schrumpfen, reißen oder reißen. Beide haben einen niedrigen Hintergrund als Nitrocellulosemembranen.

Abbildung 2: Southern-Blot-Membran

• Biodyne A besteht aus unmodifiziertem Nylon 66. Hohe Empfindlichkeit und ausgezeichnete Auflösung sind die Vorteile von Biodyne A. Da Biodyne A sowohl positive als auch negative Ladungen enthält, können viele Arten von Makromolekülen gebunden werden.
• Biodyne B besteht aus positiv geladenem Nylon 66. Daher hat es eine hervorragende Bindungskapazität für negativ geladene Nukleinsäuren wie DNA und RNA.

Ähnlichkeiten zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran

• Nitrocellulose- und Nylonmembranen sind zwei Arten von Membranen, die zum Übertragen von Makromolekülen aus dem Gel bei Blotting-Techniken verwendet werden.
• Sie ermöglichen den Nachweis von Makromolekülen auf der Membran.
• Beide Arten von Membranen können zur Übertragung von Nukleinsäuren verwendet werden.
• Sie können entkleidet und widerlegt werden.

Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran

Definition

Eine Nitrocellulosemembran bezieht sich auf eine klebrige Membran, die zum Immobilisieren von Nukleinsäuren und Proteinen beim Blotting verwendet wird, während sich eine Nylonmembran auf einen Membrantyp mit hoher Festigkeit und Hitzebeständigkeit bezieht, der zum Immobilisieren von Makromolekülen verwendet wird.

Besteht aus

Nitrocellulosemembranen bestehen aus nitrierter Cellulose, während Nylonmembranen aus unmodifiziertem oder positiv geladenem Biodyne A- und Biodyne B-Nylon bestehen.

Porengröße

Die Porengrößen der Nitrocellulosemembranen betragen 0,2 µm und 0,45 µm, während die Porengröße der Nylonmembranen 0,45 µm beträgt.

Stärke

Nitrocellulosemembranen sind spröde und daher nicht wiederverwendbar, während Nylonmembranen mechanisch fest sind.

Übertragungsmethode

Der elektrophoretische Transfer wird hauptsächlich beim Transfer von Proteinen auf die Nitrocellulosemembranen verwendet, während der Kapillartransfer bei Nylonmembranen üblich ist.

Affinität

Nitrocellulosemembranen haben eine hohe Proteinaffinität, während Nylonmembranen eine hohe Affinität zu Nukleinsäuren haben. Nitrocellulosemembranen können auch für Nukleinsäuren verwendet werden.

Blotting

Nitrocellulose-Membranen eignen sich besser für Western-Blots, während Nylon-Membranen für Southern- und Northern-Blotting besser geeignet sind.

Binding Interactions

Hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen binden Makromoleküle an die Nitrocellulosemembranen, während ionische, hydrophobe und elektrostatische Wechselwirkungen Makromoleküle an die Nylonmembranen binden.

Proteinbindungskapazität

Die Proteinbindungskapazität der Nitrozellulosemembran beträgt 80-250 µg / cm² während die Proteinbindungskapazität der Nylonmembran 150-200 μg / cm beträgt².

Fazit

Nitrocellulosemembran ist eine spröde Membran, die hauptsächlich zum Immobilisieren von Protein beim Western Blotting verwendet wird, während Nylonmembran eine starke Membran ist, die hauptsächlich zum Immobilisieren von Nukleinsäuren verwendet wird. Die Nitrocellulosemembranen binden Moleküle durch hydrophobe Wechselwirkungen, während die Nylonmembranen Moleküle durch elektrostatische Wechselwirkungen binden. Daher besteht der Hauptunterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembranen in der Affinität.

Referenz:

1. „Nitrocellulose-Membranen für Western Blotting | Thermo Fisher Scientific - LK. ”Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich
2. „Biodyne A-Nylonmembran, 0,45 m, 8 x 12 cm.“ Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich
3. "Biodyne B-Nylonmembran, 0,45 m, 8 x 12 cm". Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich

Bildhöflichkeit:

1. "Blot Biology" Von Gbdivers - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "Southern Blot Membrane" Von Bojan Žunar - Eigene Arbeit (CC BY-SA 4.0) über Commons Wikimedia