SDS-PAGE gegen Gelelektrophorese
Die Elektrophorese kann verwendet werden, um die Masse eines Objekts zu bestimmen, üblicherweise für Protein und Desoxyribonukleinsäure (DNA). Der DNA-Strang kann, wenn er in Chemikalien eingeführt wird, den Informationsprozess beschleunigen oder verlangsamen. DNA-Marker bekannter Masse werden verwendet, um die Größe der Objekte zu bestimmen, die sich nach Beendigung der Elektrophorese bewegen. Elektrophorese ist für Molekularbiologen und Biochemiker höchstwahrscheinlich das am häufigsten verwendete Werkzeug.
Es gibt zwei Arten von Elektrophorese, die üblicherweise in diesem Prozess verwendet werden. Dies sind Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) und native Gelelektrophorese.
SDS-PAGE ist eine nichtselektive Methode der Gelelektrophorese, die in Bereichen wie: Biochemie, Forensik, Biologie und Genetik verwendet wird, um Proteine von ihrer elektrophoretischen Mobilität zu lösen. SDS ist ein anionisches Tensid, das zur Lysierung von Zellen während der DNA-Extraktion und zum Trennen von Proteinen in SDS-PAGE verwendet werden kann. Während der Elektrophorese wird zunächst eine Proteinmischung in einer Lösung von SDS verflüssigt. Dann wird eine Substanz namens Mercaptoeethanol aufgetragen, um Disulfidbindungen zu entfernen und das Protein linear zu machen. Die Elektrophorese wird dann initiiert. Die Ergebnisse würden zwei Reste von Molekülen ergeben, von denen einer SDS-PAGE ist.
Das Fehlen von SDS-PAGE ist kein Problem, da Gelelektrophorese immer noch durchgeführt werden kann, nur dass Proteine nicht ihre gesamte Sekundär- und Tertiärstruktur verlieren und sich nicht in im Allgemeinen gerade Stäbchen öffnen.
In der nativen Gelelektrophorese wird Gel als antikonvektives Medium verwendet. Es wird normalerweise zur Trennung von biologischen Makromolekülen wie DNA, Ribonukleinsäure (RNA) und Protein verwendet. Es kann auch zur Trennung von Nanopartikeln verwendet werden.
Es gibt zwei Hauptgele, die in der nativen Gelelektrophorese verwendet werden, nämlich:
Agarosegel, das für größere Moleküle verwendet wird. Dieses Gel identifiziert keine kleinen Unterschiede zwischen zwei molekularen Banden. Es wird auch ausschließlich zur Trennung von DNA verwendet. Die Visualisierung des Agarosegels erfolgt mit der Mischung von Ethidiumbromid.
Polyacrylamidgel, das für kleinere Moleküle verwendet wird. Dieses Gel identifiziert die Unterschiede zwischen den molekularen Banden. Abgesehen von der DNA kann es auch Proteine trennen.
Zusammenfassung:
1.SDS-PAGE ist eine nichtselektive Methode der Gelelektrophorese, die in Bereichen wie: Biochemie, Forensik, Biologie und Genetik zum Lösen von Protein von ihrer elektrophoretischen Mobilität verwendet wird, während Gelelektrophorese üblicherweise zur Trennung von biologischen Makromolekülen wie DNA verwendet wird. Ribonukleinsäure (RNA) und Protein. Es kann auch zur Trennung von Nanopartikeln verwendet werden.
2. Die native Gelelektrophorese unterscheidet zwei Arten: Agarosegel und Polyacrylamidgel.