Warum Acetocarmin in mitotischen Chromosomenstudien eingesetzt wird

Bei der Färbung verschiedener biologischer Materialien werden unterschiedliche Färbungen verwendet. Flecken reagieren mit einer bestimmten Substanz in einer biologischen Probe und geben dieser Substanz eine bestimmte Farbe. Acetocarmin ist ein Farbstoff, der zum Nachweis von Nukleinsäuren im Chromosom verwendet wird. Es gibt auch einige andere Gründe, aus denen Acetocarmin besser als Nukleinsäurefärbung geeignet ist. Sie werden in diesem Artikel beschrieben.

Wichtige Bereiche

1. Was ist ein Fleck?
     -  Definition, Arten von Flecken
2. Was ist Acetocarmin?
     - Definition, Eigenschaften, Vorbereitung
3. Warum Acetocarmin in mitotischen Chromosomenstudien eingesetzt wird
     - Vorbereitung, Verwendung von Acetocarmin

Schlüsselbegriffe: Acetocarmin, Chromosomen, Formaldehyd, Hydrolyse, Mitotische Chromosomenstudien, Flecken

Was ist Flecken?

Bei der Färbung handelt es sich um eine Technik, die in mikroskopischen Untersuchungen von biologischen Proben verwendet wird, um den Kontrast der biologischen Probe unter dem Mikroskop zu verbessern. Es hebt die Strukturen von biologischem Gewebe wie spezifische Zellpopulationen, Organellen, DNA, Proteine, Kohlenhydrate und Lipide hervor. Der Fleck kann entweder aus synthetischen Chemikalien oder aus Pflanzen oder Tieren stammenden natürlichen Chemikalien bestehen. Die Färbemethoden werden nachstehend beschrieben.

1. Einzelne Färbung - Bei der Einzelfärbung wird nur eine Färbung verwendet, um der gesamten biologischen Probe eine einzige Farbe zu verleihen.
2. Doppelte Färbung - Bei der Doppelfärbung werden zwei Flecken verwendet, um bestimmte Organellen oder einen bestimmten Bereich zu färben.
3. Mehrfachfärbung - Bei der Mehrfachfärbung werden mehr als zwei Färbungen für die spezifische Färbung von Komponenten wie Organellen in der Probe verwendet.

Was ist Acetocarmin?

Carmin ist ein basischer Farbstoff, der aus einem Insekt hergestellt wird Coccus-Kakteen. Acetocarmin wird durch Mischen von Karmin mit Eisessig hergestellt. Es ist ein DNA-spezifischer Farbstoff, der zur Visualisierung von super-coiled Chromosomen während der verschiedenen Stadien der Mitose verwendet wird.

Zubereitung der Acetocarmin-Färbung

1. Löse 10 g Carmin in 1 Liter 45% Eisessig.
2. Fügen Sie Aluminiumgranulat hinzu und refluxieren Sie 24 Stunden lang.
3. In dunkle Flaschen filtrieren und bei 4 ° C aufbewahren.
4. Die Färbung kann durch Zugabe von Eisenchlorid (Zugabe von 5 ml einer 10% Eisenchloridlösung pro 100 ml Acetocarmin) intensiviert werden..

Warum Acetocarmin-Färbung in mitotischen Chromosomenstudien verwendet wird

Im Allgemeinen ist Acetocarmin ein Farbstoff, der bei der Einzelfärbung verwendet wird. Es färbt sowohl den Zellkern als auch das Zytoplasma. Um Chromosomen zu färben, während das Cytoplasma farblos bleibt, sollte die biologische Probe zuerst mit Formaldehyd behandelt werden. Anschließend kann sie bei 60 ° C mit HCl mit der richtigen Hydrolysedauer hydrolysiert werden. Schließlich kann es mit Acetocarmin behandelt werden. Acetocarmin produziert große Farbstoffaggregate unter schwach sauren Bedingungen (pH 4-5). Der Nachweis der Zwiebelwurzel Mitose durch Färbung mit Acetocarmin ist in gezeigt Abbildung 1.

Abbildung 1: Zwiebelwurzel Mitose

Acetocarmin ist jedoch leicht toxisch als die anderen Nukleinsäureflecken wie Aceto-Orcein. Es ist auch billiger als andere Arten von Flecken.

Fazit

Flecken werden in mikroskopischen Studien verwendet, um den Kontrast bestimmter biologischer Komponenten in einer Probe zu verbessern. Acetocarmin ist ein solcher Farbstoff, der zur Anfärbung von Nukleinsäuren in Zellen verwendet wird. Da Acetocarmin-Chromosomen neben dem Zytoplasma spezifisch anfärben, kann es zur Sichtbarmachung von Chromosomen in mitotischen Studien verwendet werden.

Referenz:

1. "ACETOCARMIN STAINING". Kansas State University, hier erhältlich.
2.J. A. Rattenbury (2009) Spezifische Anfärbung der nukleolaren Substanz mit Aceto-Carmin, Färbetechnologie, hier erhältlich.

Bildhöflichkeit:

1. "Zwiebelwurzel Mitose" Von staticd - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia