Unterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie

Das Hauptunterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie ist das Wir können Affinitätschromatographie verwenden, um geladene oder ungeladene Komponenten in einer Mischung abzutrennen, während wir Ionenaustauschchromatographie verwenden können, um geladene Komponenten in einer Mischung abzutrennen.

Chromatographie ist eine Technik, mit der wir die gewünschten Komponenten in einer Mischung trennen können. Es gibt verschiedene Typen wie Flüssigkeitschromatographie, Gaschromatographie usw. Die Affinitätschromatographie und die Ionenaustauschchromatographie sind zwei Unterkategorien der Flüssigkeitschromatographie. Bei diesen Techniken gibt es auch zwei Phasen. Sie sind nämlich die stationäre Phase und die mobile Phase. Der Zweck dieser Techniken besteht darin, die Komponenten in Abhängigkeit von der Bindung der Komponenten in der mobilen Phase auf der Oberfläche der stationären Phase zu trennen.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist Affinitätschromatographie?
3. Was ist Ionenaustauschchromatographie?
4. Side-by-Side-Vergleich - Affinität vs. Ionenaustauschchromatographie in Tabellenform
5. Zusammenfassung

Was ist Affinitätschromatographie??

Affinitätschromatographie ist eine biochemische Technik, mit der wir Komponenten in einem Gemisch in Abhängigkeit von den Wechselwirkungen zwischen diesen Komponenten trennen.

Die Interaktionen, die wir in diesem Fall verwenden, umfassen Folgendes:

1. Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen
2. Enzym-Substrat Wechselwirkungen
3. Rezeptor-Ligand-Wechselwirkungen
4. Protein-Nukleinsäure-Wechselwirkungen

Bei dieser Technik verwenden wir die molekularen Eigenschaften von Molekülen für diese Trenntechnik. Hier lassen wir die gewünschte Verbindung über Wasserstoffbrücken, Ionenwechselwirkung, Disulfidbrücken, hydrophobe Wechselwirkungen usw. mit einer stationären Phase interagieren. Die Moleküle, die nicht mit der stationären Phase interagieren, werden zuerst eluiert. So können wir es von der Mischung trennen. Die gewünschte Verbindung bleibt an der stationären Phase haften. Daher können wir es unter Verwendung eines Elutionslösungsmittels abtrennen und es auch eluieren lassen, um es ebenfalls zu trennen.

Abbildung 01: Eine chromatographische Säule

Affinitätschromatographie ist nützlich zur Reinigung und zum Konzentrieren einer Substanz aus einer Mischung unter Verwendung einer Pufferlösung. Es ist auch hilfreich, um unerwünschte Substanzen in einem Gemisch zu reduzieren. Wenn wir die Apparatur betrachten, die wir für diesen Prozess verwenden, sollten wir eine Säule verwenden, die mit unserer stationären Phase gefüllt ist. Dann sollten wir die mobile Phase laden, die die Biomoleküle enthält, die wir trennen werden. Lassen Sie sie als Nächstes mit der stationären Phase verbinden. Danach können wir mit einem Waschpuffer die Nicht-Target-Biomoleküle trennen, die Zielmoleküle sollten jedoch eine hohe Affinität für die stationäre Phase aufweisen, um den Trennungsprozess erfolgreich abzuschließen.

Was ist Ionenaustauschchromatographie??

Ionenchromatographie ist eine Form der Flüssigkeitschromatographie, in der wir ionische Substanzen analysieren können. Oft verwenden wir es zur Analyse anorganischer Anionen und Kationen (d. H. Chlorid- und Nitratanionen sowie Kalium- und Natriumkationen). Obwohl es weniger üblich ist, können wir auch organische Ionen analysieren. Darüber hinaus können wir diese Technik zur Reinigung von Proteinen verwenden, da Proteine ​​bei bestimmten pH-Werten geladene Moleküle sind. Hier verwenden wir eine feste stationäre Phase, an die sich die geladenen Teilchen anlagern können. Beispielsweise können wir die Harz-Polystyrol-Divinylbenzol-Copolymere als festen Träger verwenden.

Abbildung 02: Phasen der Ionenaustauschchromatographie

Um dies weiter zu erläutern, weist die stationäre Phase feste Ionen auf, wie Sulfatanionen oder quaternäre Aminkationen. Jedes dieser Elemente sollte mit einem Gegenion (einem Ion mit entgegengesetzter Ladung) in Verbindung stehen, wenn die Neutralität dieses Systems erhalten bleiben soll. Wenn das Gegenion ein Kation ist, wird das System als Kationenaustauscherharz bezeichnet. Wenn das Gegenion ein Anion ist, ist das System ein Anionenaustauscherharz.

In einem Ionenaustauschprozess gibt es fünf Hauptphasen;

1. Erstphase
2. Adsorption des Ziels
3. Beginn der Elution
4. Ende der Elution
5. Regeneration

Was ist der Unterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie?

Affinitätschromatographie ist eine biochemische Technik, mit der wir Komponenten in einem Gemisch in Abhängigkeit von den Wechselwirkungen zwischen diesen Komponenten trennen, während Ionenchromatographie eine Form der Flüssigkeitschromatographie ist, bei der ionische Substanzen analysiert werden können. Daher besteht der Hauptunterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie darin, dass wir Ionenaustauschchromatographie nur zur Trennung ionischer Substanzen verwenden können, während die Affinitätschromatographie sowohl geladene als auch ungeladene Partikel trennen kann. Bei der Betrachtung des Arbeitsprinzips besteht der Unterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie darin, dass die Affinitätschromatographie aufgrund der Tatsache erfolgt, dass Zielmoleküle eine hohe Affinität für die stationäre Phase aufweisen. Bei der Ionenaustauschchromatographie haben Zielmoleküle jedoch eine entgegengesetzte Ladung zu der Oberfläche der stationären Phase.

Die folgende Infografik zeigt den Unterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie als Vergleich.

Zusammenfassung - Affinität vs. Ionenaustauschchromatographie

Zusammenfassend sind Affinität und Ionenaustauschchromatographie zwei Formen flüssigkeitschromatographischer Techniken. Der Hauptunterschied zwischen Affinität und Ionenaustauschchromatographie besteht darin, dass wir Affinitätschromatographie verwenden können, um geladene oder ungeladene Komponenten in einem Gemisch zu trennen, während wir Ionenaustauschchromatographie verwenden können, um geladene Komponenten in einem Gemisch abzutrennen.

Referenz:

1. "Affinitätschromatographie." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5. Oktober 2018. Hier verfügbar 
2. Texttexte. „Ionenaustauschchromatographie“. Chemie LibreTexts, Libretexts, 29. Dezember 2016. Hier verfügbar  

Bildhöflichkeit:

1. "Nickel resin" Von Pdcook - Eigene Arbeit, (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia 
2. "Iex" von Daliak (Public Domain) über Commons Wikimedia