Koloniebildende Einheiten (CFU) und Most Probable Number (MPN) sind zwei Methoden, mit denen Mikroorganismen in Proben aufgezählt werden. Beide Parameter werden verwendet, um die Wasserqualität und die Indikatorbakterien in Wasserproben zu ermitteln. Die koloniebildende Einheit ist ein Maß, das verwendet wird, um die Anzahl der lebensfähigen Bakterienzellen oder Pilzzellen in einem spezifischen Volumen oder Gewicht einer gegebenen Probe aufzuzählen. Die Standardeinheit für diesen Parameter ist CFU / ml oder CFU / g. Die wahrscheinlichste Anzahl ist eine andere Einheit, mit der die Anzahl der lebensfähigen Bakterienzellen in einer flüssigen Probe gemessen wird. Der Hauptunterschied zwischen CFU und MPN ist das Die CFU wird aus den Bakterien- und Pilzkolonien berechnet, die auf einer festen Agarplatte wachsen während MPN wird aus lebensfähigen Bakterien berechnet, die in einem flüssigen Medium wachsen.
1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist CFU?
3. Was ist MPN?
4. Vergleich nebeneinander - CFU und MPN in Tabellenform
5. Zusammenfassung
Kolonie bildende Einheit (CFU) ist ein Parameter, der die Anzahl der lebensfähigen Bakterien- oder Pilzzellen in einer gegebenen Probe misst. Das Verfahren, das koloniebildende Einheiten zählt, wird als bezeichnet Standardplattenanzahl. Die lebensfähigen Kolonien, die auf den Agarplatten erscheinen, werden als KBE pro 1 ml (koloniebildende Einheit pro Milliliter) der Probe für Flüssigkeiten oder CFU pro 1 g (koloniebildende Einheit pro 1 g) der Probe für Feststoffe ausgedrückt.
Es gibt zwei gängige Methoden zur Messung der CFU in einer Stichprobe. Sie sind Ausbreitungsplattenmethode und Gießen Sie Plattenmethode. Diese beiden Methoden werden von einer Technik unterstützt, die als serielle Verdünnung bezeichnet wird. Serienmäßig verdünnte Proben ermöglichen das Erhalten einer zählbaren Anzahl von Kolonien auf der Agaroberfläche. Ein bekanntes Probenvolumen kann auf die Oberfläche einer Agarplatte aufgetragen oder mit Agar gemischt und auf eine Platte gegossen werden. Die Platte wird dann inkubiert und die entstehenden Kolonien werden gezählt. Die Anzahl der Kolonien bezieht sich auf die Anzahl der Mikroorganismen in der ursprünglichen Probe. Platten, die zu viele Kolonien oder zu wenige Kolonien aufweisen, werden von der Zählung ausgeschlossen, da die Ergebnisse auf diesen Platten möglicherweise nicht statistisch genau sind. Statistisch gesehen liegt der beste Bereich bei 30 - 300 Kolonien auf einer Agarplatte. Daher sollten die richtigen Platten für eine genaue Aufzählung ausgewählt werden. Die serielle Verdünnung wird für die obige Funktion durchgeführt.
Wenn Sie die Anzahl der lebenden Kolonien auf den Platten gezählt haben, können Sie die CFU / ml mithilfe der folgenden Gleichung berechnen.
KBE pro ml Originalprobe = Anzahl der Kolonien auf einer Platte X Verdünnungsfaktor
Verdünnungsfaktor = (1 / Verdünnung der Platte)
Zum Beispiel, wenn Sie 149 Kolonien auf der Platte der 10 bekommen-4 Verdünnung, dann kann die Anzahl der Bakterien in 1 ml der Originalprobe wie folgt berechnet werden:
CFU / ml = (149) × (1/10)-4)
= 149 × 104 oder 1490000
= 1,4 x 106
Abbildung 01: Koloniebildende Einheit
Das wahrscheinlichste Zahl ist eine alternative Maßnahme zu KBE / ml. MPN schätzt auch die lebensfähigen Zellen in einer flüssigen Probe. Es zählt Organismen, die in einer flüssigen Kultur wachsen, und ist eine vorwiegend bakteriologische Technik. Dieses Verfahren ist besonders nützlich für Proben, die geringe Konzentrationen an Bakterienzellen enthalten; B. Milch, Trinkwasser usw. Der MPN-Wert wird für 100 ml Volumen angegeben. MPN beruht auf einer statistischen Methode, die auf der Wahrscheinlichkeitstheorie basiert. Es gibt statistische Tabellen zum Ermitteln der MPN-Werte pro 100 ml der Probe. Diese Tabellen zeigen die Ergebnisse bei 95% Vertrauensgrenzen.
Der MPN-Wert wird berechnet, nachdem eine Technik durchgeführt wurde, die Mehrrohr-Fermentationsmethode genannt wird. Drei Sätze von Röhrchen, die ein geeignetes Kulturmedium enthalten, werden mit drei verschiedenen Volumina der Probe wie 10 ml, 1 ml und 0,1 ml beimpft und für das Wachstum inkubiert. Nach der Inkubationszeit werden die Röhrchen für das Vorhandensein oder Nichtvorhandensein von Wachstum mit + (positiv) oder - (negativ) bewertet. Das Muster der positiven und negativen Ergebnisse wird dann mit einer MPN-Tabelle der statistischen Wahrscheinlichkeiten verglichen, um die Anzahl der Mikroorganismen zu schätzen. Dann wird der MPN-Wert für 100 ml der Probe angegeben. MPN wird häufig verwendet, um in Wasserproben vorhandene coliforme Bakterien nachzuweisen.
Abbildung 02: MPN-Tabelle
CFU vs MPN | |
CFU ist ein Maß, mit dem die Anzahl lebender Bakterien- oder Pilzkolonien in einer bestimmten Probe ausgedrückt wird. | MPN ist eine alternative Maßnahme zur CFU und misst die Anzahl lebensfähiger Bakterienzellen in einer flüssigen Probe. |
Einheit | |
CFU / ml oder CFU / g | MPN / 100 ml |
Berechnung | |
Die CFU wird berechnet, indem die Anzahl der auf Agarplatten gezüchteten Kolonien gezählt wird. | Die MPN wird berechnet, indem positive und negative Muster der Röhrchen mit der MPN-Statistiktabelle verglichen werden. |
Serienverdünnungstechnik | |
Die serielle Verdünnung wird vor dem Auflegen der Proben auf Agarplatten durchgeführt. | Serienverdünnung wird normalerweise nicht durchgeführt, wenn die MPN berechnet wird |
Methoden | |
Das Spread-Plate-Verfahren und das Pour-Plate-Verfahren sind zwei Arten von Methoden, um CFU zu erhalten. | Die Mehrfachröhrchenfermentation wird durchgeführt, um den MPN-Wert zu erhalten. |
Die Messung des Mikrobenwachstums ist aus vielen Gründen erforderlich. In lebensmittelverarbeitenden Betrieben ist es erforderlich, den Gehalt und die Art von Mikroorganismen in Lebensmitteln zu messen. In der Lebensmittelindustrie und in der Medizin muss sichergestellt werden, dass Sterilisationsbehandlungen effektiv angewendet werden. In Kläranlagen muss die Keimzahl routinemäßig gezählt werden. Bei der Optimierung des Verfahrens in der Molekularbiologie ist es erforderlich, die Anzahl der Kolonien auf den Platten zu messen. Daher stehen verschiedene Methoden zur Zählung und zum Wachstum zur Verfügung. CFU und MPN sind zwei solcher Methoden, die in verschiedenen Bereichen weit verbreitet sind. CFU ist ein Maß für die Anzahl lebender Bakterien- und Pilzkolonien in einer gegebenen Probe. Die Berechnung erfolgt nach dem Standard-Plattenzählverfahren oder dem Verfahren der funktionsfähigen Plattenanzahl. MPN ist ein weiteres Maß, das die Anzahl der in einem gegebenen Volumen der flüssigen Probe vorhandenen Bakterienzellen ausdrückt. Sie wird unter Verwendung der Mehrfachröhrchenfermentationsmethode und der MPN-Tabelle berechnet. Dies ist der Unterschied zwischen CFU und MPN.
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„Koloniebildende Einheit“. Wikipedia. Wikimedia Foundation, 28. Mai 2017. Web. Hier verfügbar. 1. Juni 2017.
"Mikrobiologie - 014 - wahrscheinlichste Zahl." Mikrobiologie - 014 - wahrscheinlichste Zahl | Mikrobiologie-Grundstudium. N.p., n. D. Netz. Hier verfügbar. 1. Juni 2017.
1. "Manuelle CFU-Zählung" Von Quentin Geissmann - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "OSC Microbio 00 EE MPNTable" von CNX OpenStax - (CC BY 4.0) über Commons Wikimedia