Unterschied zwischen auswählbarem Marker und Reporter-Gen

Das Hauptunterschied zwischen Selektionsmarker und Reportergen ist das Selektierbare Marker werden verwendet, um zwischen Transformanten und Nicht-Transformanten zu unterscheiden, während das Reporter-Gen zur Messung des Expressionsniveaus des transformierten Gens verwendet wird. Darüber hinaus hat das selektierbare Markergen einen eigenen Promotor, während die Expression des Reportergens durch den Promotor des transformierten Gens reguliert wird.

Selektierbares Hersteller- und Reportergen sind zwei Arten von Genen, die zur Analyse von Transformanten in Studien verwendet werden, die transgene Organismen produzieren.

Wichtige Bereiche

1. Was ist ein auswählbarer Marker?
     - Definition, Zweck, Beispiele
2. Was ist ein Reporter-Gen?
     - Definition, Zweck, Beispiele
3. Was sind die Ähnlichkeiten zwischen dem auswählbaren Marker und dem Reporter-Gen?
     - Überblick über allgemeine Funktionen
4. Was ist der Unterschied zwischen auswählbarem Marker und Reporter-Gen?
     - Vergleich der wichtigsten Unterschiede

Schlüsselbegriffe

Genexpressionsanalyse, Gen von Interesse, Reportergen, Selektionsmarker, Transformanten

Was ist ein auswählbarer Marker?

Selektierbarer Marker ist ein Typ von Markergenen, die sich im Allgemeinen im Plasmid befinden. Es wird mit Hilfe des Plasmids in die Wirtszelle transformiert. Die Transformanten, die den selektierbaren Marker enthalten, können in dem entsprechenden selektierbaren Medium wachsen. Die Nicht-Transformanten, denen der Selektionsmarker fehlt, können jedoch nicht in diesem Selektionsmedium wachsen. Das heißt, das Genprodukt des selektierbaren Markers wird zum Selektionsfaktor für das Überleben.

Die drei Gruppen selektierbarer Marker sind Antibiotika-Resistenzgene, Antimetabolit-Markergene und Herbizidresistenzgene. Die am häufigsten verwendeten selektierbaren Marker sind die Antibiotika-Resistenzgene. Daher können nur die Transformanten in dem Medium wachsen, das das entsprechende Antibiotikum enthält.

Auswählbare Markierung 

1: Rolle von Antibiotika-resistenten Genen beim molekularen Klonieren

Jedoch enthalten möglicherweise nicht alle Transformanten das interessierende Gen. Einige Transformanten haben möglicherweise nur den Vektor mit dem selektierbaren Marker. Sequenzierung oder Genexpressionsanalyse erlaubt nur den Nachweis von Rekombinanten, die das interessierende Gen aufweisen.

Was ist ein Reporter-Gen?

Das Reportergen ist ein Typ von Markergenen, der zur Quantifizierung der Genexpression verwendet wird. Sie sind mit der regulatorischen Sequenz des interessierenden Gens fusioniert. Abgesehen von der Analyse der Expression des interessierenden Gens ermöglichen Reportergene die Untersuchung der Funktion der Genregulationselemente und der Wirkung von Transkriptionsfaktoren auf die Genexpression. Reportergene sind auch entscheidend für die Identifizierung der gewebs- oder bahnwegspezifischen Genexpression.

Abbildung 2: Rolle des Reporter-Gens

Grün fluoreszierendes Protein (GFP) und Luciferase sind die häufigsten Arten von Reportergenen. GFP ist ein leuchtendes Protein unter UV-Licht. Das Vorhandensein anderer fluoreszierender Proteine ​​wie roter und gelber fluoreszierender Proteine ​​ermöglicht die Identifizierung verschiedener Proteine ​​im selben System. Luciferase ist ein Enzym, das die Erzeugung von gelbgrünem oder blauem Licht aus dem Substrat Luciferin katalysiert.

Ähnlichkeiten zwischen auswählbarem Marker und Reporter-Gen

• Selektierbare Marker und Reportergen sind zwei Arten von Markergenen, die zur Analyse von Transformanten verwendet werden.
• Sie werden zusammen mit dem interessierenden Gen in den Wirtsorganismus umgewandelt.
• Beide Arten von Reportergenen sind unter normalen Bedingungen nicht in der Wirtszelle vorhanden. Daher sind sie der Wirtszelle nicht bekannt.

Unterschied zwischen auswählbarem Marker und Berichtsgen

Definition

Der selektierbare Marker bezieht sich auf ein Gen, dessen Expression es ermöglicht, Zellen zu identifizieren, die mit einem das Markergen enthaltenden Vektor transformiert oder transfiziert wurden, während sich das Reportergen auf ein Gen bezieht, das zum "Markieren" eines anderen Gens oder einer DNA-Sequenz von Interesse verwendet wird, wie z ein Förderer.

Bedeutung

Selektierbare Marker helfen bei der Unterscheidung zwischen Transformanten und Nichttransformanten, während das Reportergen die Expressionsmenge des transformierten Gens misst.

Promoter

Der selektierbare Marker hat seinen eigenen Promotor, während das Reporter-Gen unter dem Promotor des transformierten Gens reguliert wird.

Ort

Selektierbare Hersteller können im Plasmid oder im Genkonstrukt sein, während sich das Reporter-Gen zwischen dem Promotor und dem interessierenden Gen befindet.

Ergebnis

Transformierte Zellen mit dem selektierbaren Hersteller können in dem selektierbaren Medium wachsen, aber die Nicht-Transformante kann nicht wachsen, da ihnen der selektierbare Marker fehlt, während die Menge des Genprodukts im Reportergen von der Menge der erfolgreich transformierten Gene von Interesse abhängt.

Beispiele

Antibiotikaresistenzgene, Antimetabolit-Markergene und Herbizidresistenzgene sind die Arten von selektierbaren Markern, während GFP und Luciferase einige Reportergene sind.

Fazit

Die selektierbaren Marker sind die Markergene, die zum Screenen von Transformanten in dem entsprechenden selektierbaren Medium verwendet werden, während die Reportergene Markergene sind, um die Expressionsmenge zu messen. Der Hauptunterschied zwischen selektierbaren Marker- und Reportergenen ist die Art des Screenings.

Referenz:

1. Jha, Nandkishor. „Auswählbare Markergene und Reportergene“. Biologie-Diskussion, 16. Oktober 2015, hier erhältlich
2. „Reporter-Gen-Assays“. Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, hier erhältlich

Bildhöflichkeit:

1. "Schritte des molekularen Klonens" Von Alexpicardal97 - Eigene Arbeit (CC BY-SA 4.0) über Commons Wikimedia 
2. "Reportergen" von TransControl bei en.wikipedia (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia